划痕实验
一、实验原理
细胞划痕实验,或者叫创伤愈合实验,是一种简单、廉价的方法,也是最早发展起来的研究定向细胞在体外迁移的方法之一。该方法模拟了细胞在体内愈合过程中的迁移过程。基本步骤包括在细胞单层中创建一个“伤口”,在细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像以关闭伤口,以及比较图像以确定细胞迁移速率。
二、实验步骤:
1. 先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2. 在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
3. 第二天用枪头比着直尺,尽量垂直于背后的横线划痕,枪头要垂直,不要倾斜。
4. 用PBS洗细胞3次,去除划下的细胞,加入无血清培养基。
5. 放入37℃、5%CO2培养箱培养。按0、6、12、24小时取样,拍照。

划痕实验检测细胞迁移
细胞划痕实验,或者叫创伤愈合实验,是一种简单、廉价的方法,也是最早发展起来的研究定向细胞在体外迁移的方法之一。该方法模拟了细胞在体内愈合过程中的迁移过程。基本步骤包括在细胞单层中创建一个“伤口”,在细胞迁移过程中在开始和定期捕获图像以关闭伤口,以及比较图像以确定细胞迁移速率。
二、实验步骤:
1. 先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2. 在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
3. 第二天用枪头比着直尺,尽量垂直于背后的横线划痕,枪头要垂直,不要倾斜。
4. 用PBS洗细胞3次,去除划下的细胞,加入无血清培养基。
5. 放入37℃、5%CO2培养箱培养。按0、6、12、24小时取样,拍照。


划痕实验检测细胞迁移