动物实验服务
实验动物科学现在已经成为现代科学技术不可分割的一个组成部分,已形成一门独立的综合性基础科学门类。这门科学的重要性在于,一方面它作为科学研究的重要手段,直接影响着许多领域研究课题成果的确立和水平的高低;另一方面,作为一门科学,它的提高和发展,又会把许多领域课题的研究引入新的境地。因此,实验动物科学技术的重要性可概括为下面三句话:它是现代科学技术的重要组成部分,是生命科学的基础和条件,是衡量一个国家或一个科研单位科学研究水平的重要标志。
实验动物科学是伴随着生物医学科学,通过漫长的动物实验过程形成的。但是,实验动物科学的迅速发展,使得实验动物的研究价值已经不仅限于生物科学方面,而且广泛地与许多领域科学实验研究紧紧地联系在一起,成为保证现代科学实验研究的一个必不可少的条件。在很多领域的科学研究中,实验动物充当着非常重要的安全试验,效果试验、标准试验的角色。
在医学科研领域,主要涉及的动物有大鼠、小鼠、兔等。励茨生物经过多年探索,已经实现对部分疾病模型的成功造模。下表为常做的动物模型:
动物疾病模型构建 | |||||
疾病类型 | 动物模型 | 物种 | 构建方法 | 模型验证 | 模型成功判断 |
神经系统 | 大脑中动脉堵塞及再灌注大鼠模型 (MCAO) | 大鼠 | 线栓法制备大鼠MCAO模型,该模型具有不开颅,可控制缺血时间,重复性好,造模成功率高,模型操作简单明了,周期短等优点。 | 参照Zea Longa评价进行神经功能缺损程度评价;脑组织TTC染色观察脑梗死面积,计算梗死率。 | 神经功能缺损程度评价+TTC染色 |
小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型 ( EAE) | 小鼠 | MOG35-55稀释后与完全弗氏佐剂(含结核分枝杆菌)按1:1进行双侧腹壁或背部皮下四点注射,在诱导后第0和第2天皮下注射百日咳毒素 | 按Benson评分标准对EAE的病程进行临床评估,观察脊髓和脑组织炎症细胞浸润情况 | 神经功能评价;病理组织学:心脏灌注,取脑和脊髓组织,HE染色和Luxol fust blue髓鞘染色 | |
脑损伤模型 | 大、小鼠 | Feeney法:立体定位仪固定,切开头皮,分离骨膜,重物撞击;或侧向流体冲击 | 病理组织学:心脏灌注,取脊髓组织,HE染色、铜银染色 | 光镜下观察损伤空洞或瘢痕和脊髓最大直径比例;后肢功能丧失等。 | |
帕金森模型 | 大鼠 | 立体定位仪固定,切开头皮,颅骨钻开颅骨,注射6-OHDA; 或MPTP、LPS诱导;或者机械损伤 | 应能容易检测其运动功能的损伤,包括运动迟缓、肌僵直和静止性震颤等PD的主要症状; 模型应能显示出路易小体的形成; | 行为学(APO诱导旋转行为(需要旋转计量仪来检测)、步态调整实验(需要步态抓取和分析系统)、爪回缩实验、旷场试验等);病理组织学:心脏灌注,取脑组织,HE染色和免疫组化(TH) | |
老年性痴呆 | 大、小鼠 | 通过注射淀粉样蛋白(Aβ25-35)造成脑组织淀粉样斑块形成; 或三氧化铝诱导;或双转基因小鼠 | 脑内相关指标的测定;病理检查;行为学检查 | 行为学(水迷宫+旷场实验)、病理染色 | |
精神分裂症 | 大、小鼠 | 化学方法 | |||
戊四氮诱导小鼠癫痫模型 | 小鼠 | PTZ腹腔注射,每隔10min注射一次,直至出现癫痫症状; 或PTZ灌流 | 注射后连续5h观察小鼠是否有痫性发作并分级。①行为学表现,模型组小鼠注射海人酸后可出现湿狗样抖动、头面部肌肉阵挛、肢体阵挛及全面强直阵挛发作。生理盐水对照组未见癫痫发作。②脑电图表现,癫痫持续状态小鼠表现为持续性节律性棘波、棘慢波或高波幅慢波。③病理学研究,双侧海马均可出现神经元变性,以CA1和门区为主。 | 惊厥行为评价(Racine评分);病理组织学:心脏灌注,取脑组织,HE染色和免疫组化(C-FOS) | |
疼痛模型 | 大、小鼠 | 其他方法询实验室 | |||
大、小鼠、兔子 | S4-L5背部开口,分离肌肉,咬除L6横突,暴露L5脊神经,结扎,离断,操作复杂,定位准确 | 观察疼痛行为反应,用vonfrey纤维丝检测痛阈值 | 纤维丝检测痛阈值 | ||
镇静/催眠/麻醉 | 小鼠 | 化学诱导 | |||
脊髓损伤模型(SCI) | 大、小鼠 | 物理击打;Allen氏重物击打法:手术打开椎板,物理冲击脊髓;或脊髓压迫损伤法(球囊压迫法)、钳夹型脊髓损伤 | 光镜下观察损伤空洞或瘢痕和脊髓最大直径比例;后肢功能丧失等。 | 病理组织学:心脏灌注,取脊髓组织,HE染色、铜银染色 | |
抑郁模型 | 大、小鼠 | 应激(震荡、禁食、禁水、夹尾、热刺激、冷刺激、足底电击等),每日一种刺激,每种刺激累计2-3次 | 活动能力显著下降、兴趣丧失、快感缺乏等抑郁症临床表现 | 行为学(旷场实验300/只伍洋)、或免疫组化(海马区Trk8) | |
焦虑模型 | 大、小鼠 | 应激 | |||
消化系统 | 急性炎症性肠病模型 (IBD) | 大鼠、小鼠 | 3%DSS自由饮水或者2.5~3%TNBS灌肠 | HE和Masson观察评价,大体观察, | 急性:20天;慢性2月; |
胃溃疡模型 | 兔 | 乙醇灌胃的造模方法较为广泛,也有选用乙酸局部注射法制备模型 |
胃组织进行溃疡指数评分;取胃组织做HE染色;检测血清中PGE2、EGF、NO、SOD等的含量。 |
生化+病理 | |
非酒精性脂肪肝 | 大、小鼠 | 把STZ按200µg/只给新生第二天的小鼠,腹腔注射;断奶后,高脂饲料饲养4~8W,方法简单,死亡率低 | 测定ALT、TG、TC,病理切片检查 | 生化+病理 | |
慢性肝纤维化模型 | 大、小鼠 | 药物诱导;国内主要有CCl4诱导和酒精诱导两种造模方法,也有两种方法联合诱导大鼠模型 | 检测肝组织中PCIII、IV-C、LN、HA、CG、PLD、MAO等指标。组织切片进行Masson染色。 | 生化+病理Masson | |
酒精性肝病 | 大鼠 | 饲喂法;30~60%的酒精持续灌胃4-8周 | 检测(1)ALT、AST(2)H-E染色显示(3)DirectRed染色(4)免疫组织化学染色(α-SMA,TNF-α) | 生化+病理HE | |
脂肪肝 | 大、小鼠 | 高脂高胆固醇+维生素D喂养 | 测肝功ALT、AST、ALB、ALP及血糖、血脂,常规HE,大体观察,体重检测等 | 生化+病理HE | |
急性肝衰竭 | 小鼠 | 皮下注射CCl4,白酒灌胃,方法简单,价格便宜,但是CCl4的安全剂量范围窄,所以剂量很难把控 | ALT、AST以及肝指数和胃匀浆中的胃蛋白等指标 | 生化 | |
胆结石模型 | 小鼠、兔 | 致石食物饲喂三个月以上 | 超声检测、测定总胆红素、游离胆红素和胆固醇 | B超+生化 | |
心血管疾病 | 动脉粥样硬化 | 兔 | 高脂高胆固醇+维生素D喂养 | 检测血清胆固醇、常规HE、免疫化学染色、组织样本进行PCR或者WB检测等 | 血清胆固醇+病理HE |
主动脉粥样硬化 | Apoe缺陷黑鼠 | 高脂高胆固醇+主动脉球囊损伤 | 鼠200-300,成模率不确定 | ||
心肌缺血再灌注模型 | 大、小鼠 | 开胸手术 | 呼吸机 | ||
劲动脉、静脉置管 | 大、小鼠 | 手术建立两根血管隧道 | 操作可 | ||
骨科 | 骨关节炎 | 大鼠 | 前交叉韧带切除骨关节炎模型 | 软骨面形态观察,HE染色,PCNA染色,病理评分,病理评分,疼痛评分 | 病理HE染色 |
大鼠 | 软骨机械性半层(/全层)损伤模型 | 病理HE染色 | |||
大鼠 | 碘乙酸化学损伤骨关节炎模型 | 滑膜进行组织学观察、取软骨行组织学观察及电镜检查 | 病理HE染色 | ||
类风湿关节炎 | 大、小鼠、兔子 | II型胶原诱导 | 关节组织HE染色、疼痛评分 | 病理HE染色 | |
股骨头坏死模型(药物诱导) | 小鼠、兔子 | 用糖皮质激素连续多次肌肉注射或者无水乙醇股骨内注射 | X光检查、大体观察、常规HE和判断,以及相应免疫组织化学染色或凋亡检测 | X光检查、病理HE染色 | |
骨质疏松模型 | 大、小鼠 | 不同造模方法,不同收费标准 | 地塞米松、卵巢摘除 | ||
子宫内膜异位模型 | 大、小鼠 | 手术剥离、种植 | |||
急性尿毒症模型 | 大、小鼠 | 分两次手术,切除双侧肾脏 | 尿常规、血常规、肾功能检查,检测肌酐 | 生化指标 | |
糖尿病I型 | 大、小鼠 | 链脲佐菌素腹腔注射或尾静脉注射,造模成功后大鼠出现多饮、多尿、多食症状,该模型具有周期短、造模成功率高,胰岛B细胞损害特异性高等优点但模型大鼠死亡率高。 |
测空腹血糖值;测空腹血清胰岛素; |
生化 | |
糖尿病II型 | 大、小鼠 | 链脲佐菌素联合高脂饲料喂养共同建立大鼠模型,该模型方法稳定可靠,动物死亡率低,成功率高,可重复性好,目前国内外应用最多的方法。造模周期较长。 |
测空腹血糖值;测空腹血清胰岛素; |
生化 | |
肥胖(高脂) | 大、小鼠 | 高脂高胆固醇+维生素D喂养 | 测肝功ALT、AST、ALB、ALP及血糖、血脂,瘦素检测,常规HE,大体观察,体重检测等 | 生化+病理 | |
肾脏缺血再灌注 | 大小鼠、兔 | 腹部中上部开口,钝性分离结缔组织和脂肪组织,夹闭肾动脉30min,肾脏变黑变紫色,而后恢复供血,肾脏恢复正常颜色;手术简单,死亡率低 | 外观观察和生化指标检测(如SOD/MDA/CK等),ELISA检测TNF-α/IL-6等,BUN/Scr检测等 | 生化 | |
慢性肾功能衰竭(5/6肾切除法) | 大、小鼠、兔 | 第一次切除左肾2/3,第二次切除整个右肾,手术复杂,容易出血和感染,较易死亡;但模型稳定,易重复 | HE和Masson观察评价,测定血清中BUN、血肌酐、钙、磷等 | 生化+病理 | |
风湿性心肌炎 | 兔 | 小剂量多次腹腔注射阿霉素 | 病理学染色和观察(如HE、IHC等),病理学评判,心功能检测 | 病理HE | |
白内障 | 大鼠、小鼠 | 10~14日龄的大鼠一次性皮下注射20~30mol/kg亚硒酸钠 | 晶状体浑浊程度/晶状体生化指标(如SOD/MDA/谷胱甘肽过氧化物酶等) | 生化 | |
弥漫性血管内凝血 | 大鼠 | 腹腔注射或者静脉注射LPS | 实验后各个时间点的外周血血小板计数(PLT)、ALT、Cr、PT、APTT、FIB、D-二聚体,并进行病理组织切片观察 | 生化+病理 | |
肿瘤 | 胃癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | 肉眼观察结合HE观察和判断,以及相应免疫组织化学染色 | |
肺癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
肝癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
大肠癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
乳腺癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
胶质瘤 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
胰腺癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
食管癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
前列腺癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
甲状腺癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
鼻咽癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
头颈鳞癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
口腔癌 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
髓母细胞瘤 | BALB/C裸鼠 | 原位/皮下 | |||
骨肉瘤 | ICR小鼠、KM小鼠 | 皮下 | |||
黑色素瘤 | C57BL/6小鼠 | 皮下 | |||
小鼠艾氏腹水瘤 | ICR小鼠、KM小鼠 | 腹腔 | |||
大鼠腹水瘤W256 | Wistar 大鼠 | 腹腔 | |||
白血病 | 大鼠、小鼠 | 血液 | |||
其它 | 根据文献方法设计可行方案,进行个性化动物造模和处理 | ||||
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